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簡單了解一下NEST細胞培養有哪些相關問題
點擊次數：2039 更新時間：2020-12-17
NEST細胞培養包括初代培養及各種細胞系，當生長達到一定密度后，都需做傳代處理。傳代的頻率或間隔與培養液的性質、接種細胞數量和細胞增殖速度等有關。接種細胞數量大、細胞基數大、相同增殖速度條件下，細胞數量增加與飽和速度相對要快。連續細胞系和腫瘤細胞系比初代培養細胞增殖快，培養液中血清含量多時細胞增殖比少時快。以上情況都會縮短傳代時間。
NEST細胞培養相關問題：
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時，是否應馬上去除DMSO？
除少數特別注明對DMSO敏感之細胞外，絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞），在解凍之后，應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中，待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基，若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生及大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
5、何謂FBS,FCS,CS,HS?
FBS和FCS是相同的意思，兩者都是指胎牛血清，FCS乃錯誤的使用字眼，請不要再使用。CS則是指小牛血清。HS則是指馬血清。
6、培養細胞時應使用5%或10%CO2？或根本沒有影響？
一般培養基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統，而培養基中NaHCO3的含量將決定NEST細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時，細胞培養時應使用10%CO2；當培養基中NaHCO3為每公升1.5g時，則應使用5%CO2培養細胞。
7、何時須更換培養基？
視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上之更換時間，按時更換培養基即可。
8、培養基中是否須添加抗生素？
除于特殊篩選系統中外，一般正常培養狀態下，培養基中不應添加任何抗生素。
