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如何解決細胞培養瓶細胞成團問題有哪幾種方式

點擊次數:1931 更新時間:2022-03-28
  細胞培養瓶主要用于簡化大規模細胞培養的過程,培養瓶的設計能夠簡化您的工作流程,減少工作步驟以及降低污染風險。可以使用移液管移去、補充培養基并且收獲細胞,設計有混合區可實現在容器內的液體混合,因此可以將細胞懸液、轉染或者其他試劑直接加入到培養瓶中進行混合。同時,混合區可確保培養基和細胞在各層的均勻分布,從而保證細胞生長的均勻一致。
 
  細胞培養瓶中平均分布的培養基、Nunclon表面處理技術和有效的氣體交換共同為細胞提供了一個最佳的培養環境,從而為細胞的高產量和細胞同源性提供保障。在細胞培養中,細胞成活率和活性都有顯著提高。培養瓶裝液體積比例提高,單位體積表達量的增加。可以大量節省培養瓶和培養基的消耗,具有高重復性,不同批可擴展性次細胞生長以及產量具有很高的一致性。
 
  首先,細胞成團并不一定都會影響細胞培養進程。如果細胞輪廓清晰胞體通透,呈串狀均勻聚集,證明細胞的生長狀態良好。但多數情況下,聚團的細胞都是輪廓模糊、透光性差,甚至會出現合胞體,伴有細胞碎片,這證明細胞已經衰老或產生病變,狀態不佳。解決細胞成團問題可以通過以下幾種方式:
 
  1、如果細胞抱團不影響生長就沒問題,只是計數時較麻煩。在消化時,可在細胞由多角形變成圓型之前,用手輕磕細胞培養瓶的側壁,使細胞從壁上脫落(最好不要吹打,對細胞形狀和生長都不好)。
 
  2、如果感覺有死細胞的DNA,在細胞懸液中加入幾滴無菌的DNAse(1mg/ml溶于水)將DNA鏈打斷。輕柔地吹打細胞,防止對細胞膜造成物理損傷。
 
  3、如果細胞抱團是肉眼可見的,可讓細胞靜置半分鐘左右,然后吸取上半部分沒有抱團的細胞懸液來傳代。如果細胞抱團肉眼不可見,目前還沒有特別好的分離方法,只能等細胞狀態改善后將這部分細胞慢慢排除出去。
 
  細胞培養瓶內的細胞出現抱團現象,可以按照以上方法進行處理,在細胞培養過程中需要及時觀察細胞的生長狀態,并針對所出現的情況做出相應的調整。
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